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脐血干细胞 脐血又称胎盘血或脐带血,是胎儿出生时脐带内和胎盘近胎儿一侧血管内的血液。其中,脐血干细胞是脐血中的一种具有分化潜能的原始细胞,具备自我更新和增殖的能力,并能在特定因素的影响或诱导下,向各种细胞或组织分化。目前的研究中,脐血中的造血干/祖细胞主要用于的治疗,包括白血病、、等。并且由于脐带血中所含干细胞的免疫功能尚未发育完全,所以在配型上相对容易许多,尤其在家人中间几率更高。
P B S C 与回输:冻存物自液氮中取出后立即放入42℃水浴箱中,融化后立即回输给患者。细胞活力测定:将待测样本分别于冷冻保存前与复苏后Oh、 3 h 、 6 h 采用台盼蓝拒染法检测细胞存活率(吕 秀 荣 2 0 0 4)。这是没有速控条件下的冷冻方法,简单,易重复操作。但是由于这种降温方式在降温的过程中降温速度不恒定,冷冻保护液选择和其对细胞回收率的影响备受重视。Stiff报道了以6 % 羟乙基淀粉 (H E S )、5 % D M S O 及 4 % 人血清白蛋白(A L B )混合物作为冷冻保护液,用非程控降温将骨髓细胞置于- 8 0 ℃冻存的方法。 Halle等(2004)采 用 1 %H A S + 3 . 5 % H E S + 2 . 5 % D M S O 。张俊萍等将D M S O 、 H E S 、 A L B 和 H A S 按不同比例组成冷冻保护液,发 现 5 % D M S O + 6 % H E S +H A S 效果好。范华骅等研制的C P 8 0 低温保护 液 含 7.5% 右旋糖酐、 6.25% D M S O 和 6.25% A L B ,与样品混合后D M S O 浓 度 为 5 % 。
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1968年,Edwards 和Bavister 在体外获得了个人卵子。70年代,EC细胞注入小鼠胚泡产生杂合小鼠。培养的SC细胞作为胚胎发育的模型,虽然其染体的数目属于异常。1978年,个试管婴儿,Louise Brown 在英国诞生。1981年,Evan, Kaufman 和Martin从小鼠胚泡内细胞群分离出小鼠ES细胞。他们建立了小鼠ES细胞体外培养条件。由这些细胞产生的细胞系有正常的二倍型,像原生殖细胞一样产生三个胚层的衍生物。将ES细胞注入上鼠,能导形成畸胎瘤。
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与 脐 带 血 等 体 积 的 16 奶 培 养 液 , A C D 保 养 液 10m l , 20% D M S O ,混 匀 ,缓慢加入到脐带血中(D M S O 的终浓度为10%),静 止 5 min,放入液氮气相中, 30m i n 后投入液氮。保 护 液 配 方 : 10% D M S O , 1 2 % 右旋糖肝, 5 % 白蛋白,生理氯化钠溶液。冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 5 % ) ,混 匀 ,置- 8 0 ℃冰箱保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09个/L(马 庆 2 0 0 3)。
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