广州干细胞应用中心
脐带血有哪些用途?
脐带血中的造血干细胞可以用来治疗多种血液系统疾病和免疫系统疾病,包括血液系统恶性肿瘤(如急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤等)、骨髓增殖异常综合征、血红蛋白病(如海洋性贫血)、骨髓造血功能衰竭(如再生障碍性贫血)、先天性代谢性疾病、先天性免疫缺陷疾患、自身免疫性疾患、某些实体肿瘤(如小细胞肺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌等)。
1型糖尿病的主要机制是胰岛β细胞的破坏引起的胰岛素分泌对不足,如果能长出新的胰岛细胞,长期存活,并且产生胰岛素,就可以产生一定疗效了。所以人们设想用干细胞技术去增加体内胰岛β细胞的数量。这个想法理论上可行,但是操作起来技术环节问题很多。所以目前没有成熟到大面积推广的技术。2型糖尿病在发病初期胰岛素水平往往是正常甚至是增高的,但是身体存在胰岛素抵抗,也就是对胰岛素不敏感,血糖降不下来,这种类型的糖尿病目前来看当然就不适合用干细胞治疗了。
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脐带血直接保存作者所在实验室从医院取回的脐带血未经处理直接加入等体积的保护液,液氮保存取得较好的效果。程控降温深低温保存法保护液配方: 2 0 % 二甲基亚砜(D M S O , Sigma 公司), 8 0 % T C E 。在冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%),混 勻 ,样品放入 D W 微机降温仪中,以 代 /m i n 的速度降温至-40℃ ,然 后 以 5T /m i n 的速度降温至- 8 0 ℃ 后取出,置液氮中保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L。
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冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ,取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中,室温静置 10min ,再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法,即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ,降至- 3 0 ℃时 ,恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ , 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min,但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度,余下各阶段对细胞存活影响不大。
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