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干细胞按能力可以分为以下四类:
1.全能干细胞
由卵和精细胞的融合产生受精卵。而受精卵在形成胚胎过程中四细胞期之前任一细胞皆是全能干细胞。具有发展成独立个体的能力。也就是说能发展成一个个体的细胞就称为全能干细胞。
2.万能干细胞
是全能干细胞的后裔,无法发育成一个个体,但具有可以发育成多种组织的能力的细胞。
3.多能干细胞
只能分化成特定组织或器官等特定族群的细胞(例如血细胞,包括红血细胞、白血细胞和血小板)。
4.专一性干细胞
只能产生一种细胞类型;但是,具有自更新属性,将其与非干细胞区分开。
由于保存方法的不同,复温的形式有多种。从液氮中取出样品,在 37——42℃水浴下复温,时间不超过 5 min。过滤脐带血,将其置入过的输液瓶里,封 口 ,待患者使用。取出样品复温,水浴温度控制在4 1 ℃ ,每份脐血均可在2m i n 内冻融。加入等体积的 5 % 白蛋白和 10% L M D 混合液,混匀平衡 5 min 后离心去 D M S O , 再 用 L M D 调细胞悬液。
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骨髓应在手术室内行无菌操作。患者在麻或全麻下,用骨髓穿刺针在前、后进行多处穿刺抽取骨髓。抽取骨髓用的注射器应肝素化,控制每毫升骨髓的肝素量为20——40单 位 ,以防形成凝集。外周血造血干细胞的低温保存方法恶 性 血 液 病 患 者 采 用 C M O P 化 疗 联 合 rhG-C S F (每日l〇ng/kg)动 员 ,白细胞升至5xl09 个/L 以上时,采 用 C S -3000 P L U S 血 细 胞 分 离 机 采 集 P B S C ,处理血循环总量7000——16 OOOml(根据患者情况设定),总 产 品 55——60 ml。
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1994年,通过体外授精和病人捐献的人胚泡处于2-原核期。胚泡内细胞群在培养中得以保存其周边有滋养层细胞聚集 ,ES样细胞位于。1998年美国有两个小组分别培养出了人的多能( pluripotent )干细胞: James A. Thomson在 Wisconsin大学领导的研究小组从人胚胎组织中培养出了干细胞株。他们使用的方法是:人卵体外受精后,将胚胎培育到囊胚阶段,提取 inner cell mass细胞,建立细胞株。经测试这些细胞株的细胞表面 marker 和酶活性,实他们就是全能干细胞。用这种方法,每个胚胎可取得15-20干细胞用于培养。 John D. Gearhart在 Johns Hopkins大学领导的另一个研究小组也从人胚胎组织中建立了干细胞株。他们的方法是:从受精后5-9周人工流产的胚胎中提取生殖母细胞( primordial germ cell )。由此培养的细胞株,实具有全能干细胞的特征。
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