长沙干细胞储存
新生儿脐带血的存储意义:
1. 抓住一生中仅有的一次机会,给予孩子和家人全方位的健康保障.
2. 脐带来源的间充质干细胞丰富,变废为宝.
3. 脐带间充质干细胞临床适用疾病范围广,其中包括多种传统方法无法解决的难治性疾病.
4. 亲缘关系越亲的干细胞临床使用的效果越显著.
5. 低投入,高保障,为将来急需使用节省大笔费用
程控降温指降温过程采用程序控制,程序结束后将 P B S C 置入液氮中保存。此时的酶活性均被抑制,环境中的射线也不会对细胞造成电离损伤,可较长期保存。该技术仅以二甲亚砜 ( D M S O ) 为冷冻保护液,是经典的造血干细胞保存方法。配 制 冷 冻 保 护 液 : 50% R P M I 1640营养液、 20% D M S O 、 3 0 % 人 A B 血清或自体血浆。
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将 采 集 的 P B S C 用 R P M I 1 6 4 0 营养液调细胞浓度在 2 x l 0 7—— l x l 0 8 范围内,与等量预冷的冷冻保护液混匀,分别注入低温冷冻袋内,并留取检测样品注入冷冻管。将冷冻袋(管)放入已预冷至4℃程控降温仪内,程序化降温。 -l℃/min,降至-4〇 ℃,平 衡 3 min, -5℃ /min,降至-80℃ ,取出后放人液氮内(- 1 9 6℃)保存。存放时间为 5 年 。
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脐带血直接保存作者所在实验室从医院取回的脐带血未经处理直接加入等体积的保护液,液氮保存取得较好的效果。程控降温深低温保存法保护液配方: 2 0 % 二甲基亚砜(D M S O , Sigma 公司), 8 0 % T C E 。在冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%),混 勻 ,样品放入 D W 微机降温仪中,以 代 /m i n 的速度降温至-40℃ ,然 后 以 5T /m i n 的速度降温至- 8 0 ℃ 后取出,置液氮中保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L。
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