骨髓间充质干细胞的提取
脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞,主要包括造血干细胞(HSCs))、间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs))等。其中,造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。
造血干细胞可分化为所有类型的血细胞;间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化,两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。
干细胞具有自我更新能力(Self-renewing),能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞 。胚胎干细胞(Embryonic Stem cell, ES细胞)。胚胎干细胞当受精卵分裂发育成囊胚时,内层细胞团(Inner Cell Mass)的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞具有全能性,可以自我更新并具有分化为体内组织的能力。早在1970年Martin Evans已从小鼠中分离出胚胎干细胞并在体外进行培养。而人的胚胎干细胞的体外培养直到近才获得成功。
骨髓间充质干细胞的提取
随着干细胞研究领域向深度和广度不断扩展,人们对干细胞的了解也将更加全面。21世纪是生命科学的时代,也是为人类的健康长寿创造世界的时代,干细胞的应用将有广阔前景。肌肉干细胞(muscle stem cell)可发育分化为成肌细胞(myoblasts),后者可互相融合成为多核的肌纤维,形成骨骼肌基本的结构。[编辑本段]2.【基础应用】干细胞的调控是指给出适当的因子条件,对干细胞的增值和分化进行调控,使之向指定的方向发展。
骨髓间充质干细胞的提取
脐带血直接保存作者所在实验室从医院取回的脐带血未经处理直接加入等体积的保护液,液氮保存取得较好的效果。程控降温深低温保存法保护液配方: 2 0 % 二甲基亚砜(D M S O , Sigma 公司), 8 0 % T C E 。在冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%),混 勻 ,样品放入 D W 微机降温仪中,以 代 /m i n 的速度降温至-40℃ ,然 后 以 5T /m i n 的速度降温至- 8 0 ℃ 后取出,置液氮中保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L。
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