免疫细胞怎么查
脐带血干细胞的作用:
脐带血中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成人体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞,神经细胞,骨骼细胞等等。随着科技的发达,医学专家研究出利用脐带血中的干细胞来治疗疾病的方法。
干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体。这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。
近三十年来的医学研究发现,脐带血中含有非常丰富的造血干细胞(HSC),可以重建人体造血和免疫系统,可用于造血干细胞移植,治疗血液系统、免疫系统,以及遗传代谢性及先天性疾病。因此,脐带血已成为造血干细胞的重要来源,已经被广泛地应用于临床,是宝贵的人类生物资源。
1984—1988年,Anderews 等人从人睾丸畸胎瘤细胞系Tera-2中产生出多能的、可鉴定的(克隆化的)细胞,称之为胚胎癌细胞(embryonic carcinoma cells, EC细胞)。克隆的人EC细胞在视黄酸的作用下分化形成神经元样细胞和其他类型的细胞。1989年,Pera 等分离了一个人EC细胞系,此细胞系能产生出三个胚层的组织。这些细胞是非整倍体的(比正常细胞染体多或少),他们在体外的分化潜能是有限的。
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用密闭式收集法采集顺产或剖宫产的新生儿的脐带血。孕妇年龄小于3 5 岁 、足月妊娠 、无并发症、产前血液检查H b >90 g/L 、 检 测 HbsA g 、 H C V 、 anti-HIV1/2 抗体、梅 毒 阴 性 。孕 妇 及 丈 夫 均 无 遗 传 性 疾 病 家 族 史 。采用枸橼酸 钠 腺 嘌 呤 保 护 液 (citratephosp 上 ate dextrose adenine, C P D A ) 抗凝的密闭式血袋在胎盘娩出前从脐带断端远离新生儿侧采集。、采集后室温保存, 18 h 内运输至脐带血保存库。
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胎肝细胞悬液的制备人胎肝取至水囊引产或剖腹产的4〜6个月正常胎儿。在无菌条件下从腹腔取出胎肝,同时从心脏取血查胎儿血型。剔除粘连在肝脏表面的结缔组织和胆囊后,将肝脏置于培养皿中剪成小组织块,然后投入装有双层不锈钢(内层孔径为 1 0 0 目,外 层 为 1 8 0 目/in2(lin2=6.451600xl0-4 m 2))的小烧杯。用少量培养液或生理盐水(经细胞培养,热原试验均为阴性),将组织块冲洗2〜 3 次 ,弃去洗涤液,然后倒入20 ml P R M I 1640培养液,并用注射器针芯在钢网内将组织块研磨,如此 重 复 3 次 ,即可取出胎肝中大部分的造血干细胞。将合并收集的细胞悬液通过4 号的注射器制成单细胞悬液。
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