鉴定干细胞的三种方法
脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞,主要包括造血干细胞(HSCs))、间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs))等。其中,造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。
造血干细胞可分化为所有类型的血细胞;间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化,两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。
干细胞自身有许多调控因子可对外界信号起反应从而调节其增殖和分化,包括调节细胞不对称分裂的蛋白,控制基因表达的核因子等。另外,干细胞在终末分化之前所进行的分裂次数也受到细胞内调控因子的制约。细胞内蛋白对干细胞分裂的调控干细胞分裂可能产生新的干细胞或分化的功能细胞。这种分化的不对称是由于细胞本身成分的不均等分配和周围环境的作用造成的。细胞的结构蛋白,是细胞骨架成分对细胞的发育重要。如在果蝇卵巢中,调控干细胞不对称分裂的是一种称为收缩体的细胞器,包含有许多调节蛋白,如膜收缩蛋白和细胞周期素A。收缩体与纺锤体的结合决定了干细胞分裂的部位,从而把维持干细胞性状所的成分保留在子代干细胞中。
鉴定干细胞的三种方法
Q:干细胞的作用是什么?A:人体的细胞有200多种,行使着不同的作用。这两百种不同的细胞都有一个相同的来源,这就是干细胞。干细胞可以在人体中修复替代我们受损的组织器官,因此具有巨大的临床使用价值。干细胞可以治疗的疾病在五年前是20种,到2010年底干细胞可以治疗包括正在进行临床试验的疾病有92种,这包括血液系统疾病(如白血病),免疫系统疾病(如红斑疮),心脑血管疾病,内分泌系统和神经系统疾病。随着技术的发展干细胞可以治疗的疾病数量将大大增加。在未来,利用干细胞的强大的分化能力,科学家有望使用干细胞培育出人体器官,这将大大推动现代医学的发展。胎盘、脐带中含有的干细胞,获取过程十分简单,临床使用十分方便,是自体储存干细胞的重要来源。
鉴定干细胞的三种方法
P B S C 与回输:冻存物自液氮中取出后立即放入42℃水浴箱中,融化后立即回输给患者。细胞活力测定:将待测样本分别于冷冻保存前与复苏后Oh、 3 h 、 6 h 采用台盼蓝拒染法检测细胞存活率(吕 秀 荣 2 0 0 4)。这是没有速控条件下的冷冻方法,简单,易重复操作。但是由于这种降温方式在降温的过程中降温速度不恒定,冷冻保护液选择和其对细胞回收率的影响备受重视。Stiff报道了以6 % 羟乙基淀粉 (H E S )、5 % D M S O 及 4 % 人血清白蛋白(A L B )混合物作为冷冻保护液,用非程控降温将骨髓细胞置于- 8 0 ℃冻存的方法。 Halle等(2004)采 用 1 %H A S + 3 . 5 % H E S + 2 . 5 % D M S O 。张俊萍等将D M S O 、 H E S 、 A L B 和 H A S 按不同比例组成冷冻保护液,发 现 5 % D M S O + 6 % H E S +H A S 效果好。范华骅等研制的C P 8 0 低温保护 液 含 7.5% 右旋糖酐、 6.25% D M S O 和 6.25% A L B ,与样品混合后D M S O 浓 度 为 5 % 。
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