眼科干细胞技术最新进展
脐血干细胞 脐血又称胎盘血或脐带血,是胎儿出生时脐带内和胎盘近胎儿一侧血管内的血液。其中,脐血干细胞是脐血中的一种具有分化潜能的原始细胞,具备自我更新和增殖的能力,并能在特定因素的影响或诱导下,向各种细胞或组织分化。目前的研究中,脐血中的造血干/祖细胞主要用于的治疗,包括白血病、、等。并且由于脐带血中所含干细胞的免疫功能尚未发育完全,所以在配型上相对容易许多,尤其在家人中间几率更高。
胎肝细胞悬液的制备人胎肝取至水囊引产或剖腹产的4〜6个月正常胎儿。在无菌条件下从腹腔取出胎肝,同时从心脏取血查胎儿血型。剔除粘连在肝脏表面的结缔组织和胆囊后,将肝脏置于培养皿中剪成小组织块,然后投入装有双层不锈钢(内层孔径为 1 0 0 目,外 层 为 1 8 0 目/in2(lin2=6.451600xl0-4 m 2))的小烧杯。用少量培养液或生理盐水(经细胞培养,热原试验均为阴性),将组织块冲洗2〜 3 次 ,弃去洗涤液,然后倒入20 ml P R M I 1640培养液,并用注射器针芯在钢网内将组织块研磨,如此 重 复 3 次 ,即可取出胎肝中大部分的造血干细胞。将合并收集的细胞悬液通过4 号的注射器制成单细胞悬液。
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干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已成功地在体外培养。研究发现,成体干细胞可以横向分化为其它类型的细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。在胚胎的发育中,单个受精卵可以分裂发育为多细胞组织或器官。在成年动物中,正常的胜生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成年组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的,具有分化为几乎组织和器官的能力。而成年组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性,只能分化特定的细胞或组织。
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胎盘间充质干细胞胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在胚胎发育中来源于中胚层,易于分离扩增,体外倍增能力旺盛,即使扩增1亿倍仍能保持其多向分化能力。因此,MSC是一种实用的组织修复种子细胞。可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。在脐带和胎盘中提取MSC有以下优势:其一,是医疗废弃物,属于胎儿附属物,对母婴无害,采集之前会对产妇进行健康检查并签署知情同意书,不受伦理限制;其二,提取的细胞相对纯净且数量充足;其三,细胞低免疫原性、无致瘤性,不会随着传代次数增加以及机体年龄增长导致增殖能力和分化能力降低;其四,是较为原始的干细胞,具有强的可塑性和较强的扩增能力。
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