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脐血干细胞的保存 婴儿出生后,留在脐带及胎盘内的血就是脐带血。自古以来,这些血被当成废物丢弃,目前采集脐带血的方式是:婴儿出生后,脐带接扎,剪断,婴儿由助产护士、擦洗、包裹、护理的同时,既可从脐带血(体内采集),也可待胎盘娩出后再采集(体外采集)。两种方法采集量均可在80ml 左右。
脐血采集不会对婴儿和母体造成任何不利影响,只是将原来作为废弃物的脐血收集下来。但应注意的一点是,采集后的脐血应于 24 小时之内进行处理,运送过程中应避免紫外线照射及剧烈震荡,以充分保持细胞的活性。保存者应在产前提前与医院及脐血库联络,以保证脐血的及时、顺利采集。
胎肝细胞悬液的制备人胎肝取至水囊引产或剖腹产的4〜6个月正常胎儿。在无菌条件下从腹腔取出胎肝,同时从心脏取血查胎儿血型。剔除粘连在肝脏表面的结缔组织和胆囊后,将肝脏置于培养皿中剪成小组织块,然后投入装有双层不锈钢(内层孔径为 1 0 0 目,外 层 为 1 8 0 目/in2(lin2=6.451600xl0-4 m 2))的小烧杯。用少量培养液或生理盐水(经细胞培养,热原试验均为阴性),将组织块冲洗2〜 3 次 ,弃去洗涤液,然后倒入20 ml P R M I 1640培养液,并用注射器针芯在钢网内将组织块研磨,如此 重 复 3 次 ,即可取出胎肝中大部分的造血干细胞。将合并收集的细胞悬液通过4 号的注射器制成单细胞悬液。
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牙髓干细胞是如何被储存的?可存储多久?在- 196°C的液氮罐中进行储存。据研究,干细胞可长期冷冻储存,且现今储存以二十年存储为主,将来二十年到期后,仅需缴纳续存的保管费即可采集过程对身体有影响吗?除了拔除牙齿外,没有其他的影响。储存牙髓干细胞,有什么要求?在拔牙前,请不要饮用酸奶、优酸乳等益生菌食物,预防牙髓干细胞制备失败。储存者血液检查应合格。检查包含HBsAg (乙肝表面抗原),HBcAb (乙肝核心抗体) ,HCV-Ab (丙肝抗体) , Anti-HIV (艾滋病抗体) ,CMV-LGM (巨细胞LGM抗体),梅毒血清,EBV (疱疹)等。
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程控降温指降温过程采用程序控制,程序结束后将 P B S C 置入液氮中保存。此时的酶活性均被抑制,环境中的射线也不会对细胞造成电离损伤,可较长期保存。该技术仅以二甲亚砜 ( D M S O ) 为冷冻保护液,是经典的造血干细胞保存方法。配 制 冷 冻 保 护 液 : 50% R P M I 1640营养液、 20% D M S O 、 3 0 % 人 A B 血清或自体血浆。
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