干细胞研究院
脐带血干细胞移植的优点相较于骨髓、外周血干细胞移植等传统的干细胞移植方法,脐带血干细胞移植具有以下优点:
①脐带血中的干细胞浓度及纯度较高,是骨髓干细胞的10—20倍,其增殖能力也远超骨髓干细胞;
②来源方便,新生儿出生时即可收集脐带血;
③治疗费用低、移植准备时间短,尤其适用于病情不稳定、发展迅速的患者;
④脐带血干细胞移植对配型要求的严格程度低于骨髓干细胞移植,所以配型成功率较高;
⑤脐带血淋巴细胞大多数为初始型细胞,其免疫效应分子和受体表达不够完善,因此免疫功能较不成熟,排斥反应发生率较低;
⑥脐带血受胎盘屏障的保护,细胞自身传染病感染率较低;
⑦相较于胚胎干细胞移植来说,脐带血干细胞移植不存在伦理问题。
然而,这个观点目前受到了挑战。的研究表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其它细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。按分化潜能的大小,干细胞基本上可分为三种类型:一类是全能性干细胞,它具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞,它是从早期胚胎内的细胞团分离出来的一种高度未分化的细胞系,具有与早期胚胎细胞相似的形态特征和很强的分化能力,它可以无限增殖并分化成为全身200多种细胞类型,进一步形成机体的组织、器官。另一类是多能性干细胞,这种干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能,但却失去了发育成完整个体的能力,发育潜能受到一定的限制,骨髓多能造血干细胞是典型的例子,它可分化出至少十一中血细胞,但不分化出造血系统以外的其他细胞。还有一类干细胞为单能干细胞(也称专能、偏能干细胞),这类干细胞只能向一种类型或密切相关的两种类型的,如上皮组织基底层的干细胞、肌肉中的成肌细胞。
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与 脐 带 血 等 体 积 的 16 奶 培 养 液 , A C D 保 养 液 10m l , 20% D M S O ,混 匀 ,缓慢加入到脐带血中(D M S O 的终浓度为10%),静 止 5 min,放入液氮气相中, 30m i n 后投入液氮。保 护 液 配 方 : 10% D M S O , 1 2 % 右旋糖肝, 5 % 白蛋白,生理氯化钠溶液。冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 5 % ) ,混 匀 ,置- 8 0 ℃冰箱保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09个/L(马 庆 2 0 0 3)。
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米 用 6 % (质量分数) 轻乙基淀粉(h e s , 平均相对分子质量 480 000, H e s p a n , D u p o n ,美国) 沉降后一次离心方法去除大多数红细胞及大部分血浆。具体方法:每份脐带血按体 积 比 1 : 4 的比例加入脐带血内,充 分 混 勻 ,垂 直 倒 置 悬 挂 ,使红细胞自然沉降20〜 3 0 m i n , 直至红细胞界面下降时,去除红细胞。再将富含有核细胞的血裝在 1〇℃ 4 00g 离 心 l O m i n , 沉降有核细胞。用血浆积压器去除部分血浆。体 积 为 30——40ml。以上操作均在采集袋中操作 。
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