北科干细胞存的费用
脐带血干细胞移植的优点相较于骨髓、外周血干细胞移植等传统的干细胞移植方法,脐带血干细胞移植具有以下优点:
①脐带血中的干细胞浓度及纯度较高,是骨髓干细胞的10—20倍,其增殖能力也远超骨髓干细胞;
②来源方便,新生儿出生时即可收集脐带血;
③治疗费用低、移植准备时间短,尤其适用于病情不稳定、发展迅速的患者;
④脐带血干细胞移植对配型要求的严格程度低于骨髓干细胞移植,所以配型成功率较高;
⑤脐带血淋巴细胞大多数为初始型细胞,其免疫效应分子和受体表达不够完善,因此免疫功能较不成熟,排斥反应发生率较低;
⑥脐带血受胎盘屏障的保护,细胞自身传染病感染率较低;
⑦相较于胚胎干细胞移植来说,脐带血干细胞移植不存在伦理问题。
也有选用单一冷冻保护液的。 Galmes等(1995)首先提出以10% D M S O 为保护液,细胞冷冻后储存于-80℃的方法。 Hemandez-Navarro等 以 10% D M S O 和 H A S 混合物为冷冻保护液,将 装 有 P B S C 的冷冻袋放入9 5 % 甲醇液中,直接置于-80°C 保存,细胞回输后造血恢复情况与其他方法无明显差异。叶韵斌等(2000)对 使 用 10% D M S O 单一保护液和 5 % D M S O + 6 % H E S + 4 % A L B 混合保护液的效果进行比较,发现在冻存180天以内二者差异不大,细胞活力在8 5 % 以上, C D 34+阳性细胞比例、粒单集落数均维持治疗水平。
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脐带血直接保存作者所在实验室从医院取回的脐带血未经处理直接加入等体积的保护液,液氮保存取得较好的效果。程控降温深低温保存法保护液配方: 2 0 % 二甲基亚砜(D M S O , Sigma 公司), 8 0 % T C E 。在冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%),混 勻 ,样品放入 D W 微机降温仪中,以 代 /m i n 的速度降温至-40℃ ,然 后 以 5T /m i n 的速度降温至- 8 0 ℃ 后取出,置液氮中保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L。
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P B S C 与回输:冻存物自液氮中取出后立即放入42℃水浴箱中,融化后立即回输给患者。细胞活力测定:将待测样本分别于冷冻保存前与复苏后Oh、 3 h 、 6 h 采用台盼蓝拒染法检测细胞存活率(吕 秀 荣 2 0 0 4)。这是没有速控条件下的冷冻方法,简单,易重复操作。但是由于这种降温方式在降温的过程中降温速度不恒定,冷冻保护液选择和其对细胞回收率的影响备受重视。Stiff报道了以6 % 羟乙基淀粉 (H E S )、5 % D M S O 及 4 % 人血清白蛋白(A L B )混合物作为冷冻保护液,用非程控降温将骨髓细胞置于- 8 0 ℃冻存的方法。 Halle等(2004)采 用 1 %H A S + 3 . 5 % H E S + 2 . 5 % D M S O 。张俊萍等将D M S O 、 H E S 、 A L B 和 H A S 按不同比例组成冷冻保护液,发 现 5 % D M S O + 6 % H E S +H A S 效果好。范华骅等研制的C P 8 0 低温保护 液 含 7.5% 右旋糖酐、 6.25% D M S O 和 6.25% A L B ,与样品混合后D M S O 浓 度 为 5 % 。
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