华西医院干细胞研究
脐血干细胞的保存 婴儿出生后,留在脐带及胎盘内的血就是脐带血。自古以来,这些血被当成废物丢弃,目前采集脐带血的方式是:婴儿出生后,脐带接扎,剪断,婴儿由助产护士、擦洗、包裹、护理的同时,既可从脐带血(体内采集),也可待胎盘娩出后再采集(体外采集)。两种方法采集量均可在80ml 左右。
脐血采集不会对婴儿和母体造成任何不利影响,只是将原来作为废弃物的脐血收集下来。但应注意的一点是,采集后的脐血应于 24 小时之内进行处理,运送过程中应避免紫外线照射及剧烈震荡,以充分保持细胞的活性。保存者应在产前提前与医院及脐血库联络,以保证脐血的及时、顺利采集。
与 脐 带 血 等 体 积 的 16 奶 培 养 液 , A C D 保 养 液 10m l , 20% D M S O ,混 匀 ,缓慢加入到脐带血中(D M S O 的终浓度为10%),静 止 5 min,放入液氮气相中, 30m i n 后投入液氮。保 护 液 配 方 : 10% D M S O , 1 2 % 右旋糖肝, 5 % 白蛋白,生理氯化钠溶液。冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 5 % ) ,混 匀 ,置- 8 0 ℃冰箱保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09个/L(马 庆 2 0 0 3)。
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胎盘间充质干细胞胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在胚胎发育中来源于中胚层,易于分离扩增,体外倍增能力旺盛,即使扩增1亿倍仍能保持其多向分化能力。因此,MSC是一种实用的组织修复种子细胞。可以用来修复受损或病变的组织器官,治疗心、脑血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病、骨组织病、角膜损伤、烧伤烫伤、肌病等多种疾病。在脐带和胎盘中提取MSC有以下优势:其一,是医疗废弃物,属于胎儿附属物,对母婴无害,采集之前会对产妇进行健康检查并签署知情同意书,不受伦理限制;其二,提取的细胞相对纯净且数量充足;其三,细胞低免疫原性、无致瘤性,不会随着传代次数增加以及机体年龄增长导致增殖能力和分化能力降低;其四,是较为原始的干细胞,具有强的可塑性和较强的扩增能力。
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干细胞的可塑性越来越多的据表明,当成体干细胞被移植入受体中,它们表现出很强的可塑性。通常情况下,供体的干细胞在受体中分化为与其组织来源一致的细胞。而在某些情况下干细胞的分化并不遵循这种规律。1999年Goodell等人分离出小鼠的肌肉干细胞,体外培养5天后,与少量的骨髓间质细胞一起移植入接受致死量辐射的小鼠中,结果发现肌肉干细胞会分化为各种血细胞系。这种现象被称为干细胞的横向分化(trans-differentiation)。关于横向分化的调控机制目前还不清楚。大多数观点认为干细胞的分化与微环境密切相关。可能的机制是,干细胞进入新的微环境后,对分化信号的反应受到周围正在进行分化的细胞的影响,从而对新的微环境中的调节信号做出反应。 克隆猪、克隆羊,其技术的机制原理和干细胞是一致的。
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