新冠 美国实验室
脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞,主要包括造血干细胞(HSCs))、间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs))等。其中,造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。
造血干细胞可分化为所有类型的血细胞;间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化,两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。
冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ,取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中,室温静置 10min ,再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法,即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ,降至- 3 0 ℃时 ,恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ , 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min,但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度,余下各阶段对细胞存活影响不大。
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此外,储存了宝宝的脐带、胎盘干细胞,由于其免疫原性低,干细胞适用性高,全家人皆可使用。储存流程复杂吗?是否对身体有伤害?很多人关心,新生儿干细胞储存对于产妇和宝宝身体是否有伤害?其实,新生儿干细胞储存流程对于产妇和宝宝来说简单。在分娩后,只需要助产士或护士按照要求将脐带剪断,并和胎盘一起放到的采集设施,由专职人员送至的细胞制备实验室即可。所以,这种干细胞样本的采集方式,实际上是对分娩附属品的一种再利用,同时,是一种无侵入性的采集方法:供者苦,对母婴无伤害。脐带、胎盘送到细胞制备实验室后,由技术人员对其进行细胞制备、检测和入库冻存,完成珍贵生命资源的保存。
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与 脐 带 血 等 体 积 的 16 奶 培 养 液 , A C D 保 养 液 10m l , 20% D M S O ,混 匀 ,缓慢加入到脐带血中(D M S O 的终浓度为10%),静 止 5 min,放入液氮气相中, 30m i n 后投入液氮。保 护 液 配 方 : 10% D M S O , 1 2 % 右旋糖肝, 5 % 白蛋白,生理氯化钠溶液。冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 5 % ) ,混 匀 ,置- 8 0 ℃冰箱保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09个/L(马 庆 2 0 0 3)。
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