珠海干细胞基地
脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞,主要包括造血干细胞(HSCs))、间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs))等。其中,造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。
造血干细胞可分化为所有类型的血细胞;间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化,两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。
骨髓应在手术室内行无菌操作。患者在麻或全麻下,用骨髓穿刺针在前、后进行多处穿刺抽取骨髓。抽取骨髓用的注射器应肝素化,控制每毫升骨髓的肝素量为20——40单 位 ,以防形成凝集。外周血造血干细胞的低温保存方法恶 性 血 液 病 患 者 采 用 C M O P 化 疗 联 合 rhG-C S F (每日l〇ng/kg)动 员 ,白细胞升至5xl09 个/L 以上时,采 用 C S -3000 P L U S 血 细 胞 分 离 机 采 集 P B S C ,处理血循环总量7000——16 OOOml(根据患者情况设定),总 产 品 55——60 ml。
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牙髓干细胞是具有多能分化和自我更新能力的间充质干细胞,早从恒牙牙髓中分离出来,来自孩子脱落的乳牙也可以分离出牙髓干细胞。牙髓干细胞,具有自我更新和多向分化的能力,且易于获得、可通过性常规临床操作分离、伦理问题较少,与典型的骨髓间充质干细胞相比,无论是再生潜能还是增殖能力均较高。但其细胞量很少,应用暂时不是很广泛。脂肪间充质干细胞脂肪间充质干细胞取自健康(18至45岁)抽脂手术所得脂肪组织,具有较强的体外增殖能力,具有生物学特性稳定、来源充足、 体外培养条件低等优势。目前,研究人员已成功地在体外将其导为内皮细胞,成骨细胞、成软骨细胞、脂肪前体细胞、平滑肌细胞,心肌细胞、神经样细胞等。
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米 用 6 % (质量分数) 轻乙基淀粉(h e s , 平均相对分子质量 480 000, H e s p a n , D u p o n ,美国) 沉降后一次离心方法去除大多数红细胞及大部分血浆。具体方法:每份脐带血按体 积 比 1 : 4 的比例加入脐带血内,充 分 混 勻 ,垂 直 倒 置 悬 挂 ,使红细胞自然沉降20〜 3 0 m i n , 直至红细胞界面下降时,去除红细胞。再将富含有核细胞的血裝在 1〇℃ 4 00g 离 心 l O m i n , 沉降有核细胞。用血浆积压器去除部分血浆。体 积 为 30——40ml。以上操作均在采集袋中操作 。
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