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脐带血干细胞及其移植脐带血中含有多种类型的干细胞,主要包括造血干细胞(HSCs))、间充质干细胞(MSCs)和内皮祖细胞(EPCs))等。其中,造血干细胞和间充质干细胞在脐带血中含量较多。
造血干细胞可分化为所有类型的血细胞;间充质干细胞在一定条件下进行体外培养和诱导可以向神经、成骨、软骨、脂肪、肌腱、肌肉和心肌等细胞方向分化,两者均已广泛应用于临床干细胞移植研究。
Q:干细胞采集好了,怎么保存?能保存多久呢?干细胞样本送到实验室后→由的工作人员接收,核对供者资料,建立电子档案,检查相关资料(包括每份样本所属资料如:血袋、各检测应用试管、培养器皿等一切用品,条形码统一标识→制备(留取检测标本)→冻存(-196℃液氮)。每一环节都有2人以上核对,以每一份干细胞的各相关资料及检测标本的统一。每个液氮罐都有计算机自动控制补充液氮系统和电子自动报警装置,同时工作人员每日检查和记录罐中的液氮量,确保干细胞的保存。保存的干细胞在使用前,工作人员还会进行复核,以确保干细胞各项符合出库要求。
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与 脐 带 血 等 体 积 的 16 奶 培 养 液 , A C D 保 养 液 10m l , 20% D M S O ,混 匀 ,缓慢加入到脐带血中(D M S O 的终浓度为10%),静 止 5 min,放入液氮气相中, 30m i n 后投入液氮。保 护 液 配 方 : 10% D M S O , 1 2 % 右旋糖肝, 5 % 白蛋白,生理氯化钠溶液。冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 5 % ) ,混 匀 ,置- 8 0 ℃冰箱保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09个/L(马 庆 2 0 0 3)。
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将 采 集 的 P B S C 用 R P M I 1 6 4 0 营养液调细胞浓度在 2 x l 0 7—— l x l 0 8 范围内,与等量预冷的冷冻保护液混匀,分别注入低温冷冻袋内,并留取检测样品注入冷冻管。将冷冻袋(管)放入已预冷至4℃程控降温仪内,程序化降温。 -l℃/min,降至-4〇 ℃,平 衡 3 min, -5℃ /min,降至-80℃ ,取出后放人液氮内(- 1 9 6℃)保存。存放时间为 5 年 。
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