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脐带血有哪些用途?
脐带血中的造血干细胞可以用来治疗多种血液系统疾病和免疫系统疾病,包括血液系统恶性肿瘤(如急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤等)、骨髓增殖异常综合征、血红蛋白病(如海洋性贫血)、骨髓造血功能衰竭(如再生障碍性贫血)、先天性代谢性疾病、先天性免疫缺陷疾患、自身免疫性疾患、某些实体肿瘤(如小细胞肺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌等)。
除内源性调控外,干细胞的分化还可受到其周围组织及细胞外基质等外源性因素的影响。间质细胞能够分泌许多因子,维持干细胞的增殖,分化和存活。有两类因子在不同组织甚至不同种属中都发挥重要作用,它们是TGFβ家族和Wnt信号通路。比如TGF家族中至少有两个成员能够调节神经嵴干细胞的分化。近研究发现,胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)不仅能够促进多种神经元的存活和分化,还对精原细胞的再生和分化有决定作用。GDNF缺失的小鼠表现为干细胞数量的减少,而GDNF的过度表达导致未分化的精原细胞的累积[3]。Wnts的作用机制是通过阻止β-Catenin分解从而Tcf/Lef介导的转录,促进干细胞的分化。比如在线虫卵裂球的分裂中,邻近细胞导的Wnt信号通路能够控制纺锤体的起始和内胚层的分化。
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米 用 6 % (质量分数) 轻乙基淀粉(h e s , 平均相对分子质量 480 000, H e s p a n , D u p o n ,美国) 沉降后一次离心方法去除大多数红细胞及大部分血浆。具体方法:每份脐带血按体 积 比 1 : 4 的比例加入脐带血内,充 分 混 勻 ,垂 直 倒 置 悬 挂 ,使红细胞自然沉降20〜 3 0 m i n , 直至红细胞界面下降时,去除红细胞。再将富含有核细胞的血裝在 1〇℃ 4 00g 离 心 l O m i n , 沉降有核细胞。用血浆积压器去除部分血浆。体 积 为 30——40ml。以上操作均在采集袋中操作 。
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程控降温指降温过程采用程序控制,程序结束后将 P B S C 置入液氮中保存。此时的酶活性均被抑制,环境中的射线也不会对细胞造成电离损伤,可较长期保存。该技术仅以二甲亚砜 ( D M S O ) 为冷冻保护液,是经典的造血干细胞保存方法。配 制 冷 冻 保 护 液 : 50% R P M I 1640营养液、 20% D M S O 、 3 0 % 人 A B 血清或自体血浆。
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