单细胞制备
脐带血干细胞移植的优点相较于骨髓、外周血干细胞移植等传统的干细胞移植方法,脐带血干细胞移植具有以下优点:
①脐带血中的干细胞浓度及纯度较高,是骨髓干细胞的10—20倍,其增殖能力也远超骨髓干细胞;
②来源方便,新生儿出生时即可收集脐带血;
③治疗费用低、移植准备时间短,尤其适用于病情不稳定、发展迅速的患者;
④脐带血干细胞移植对配型要求的严格程度低于骨髓干细胞移植,所以配型成功率较高;
⑤脐带血淋巴细胞大多数为初始型细胞,其免疫效应分子和受体表达不够完善,因此免疫功能较不成熟,排斥反应发生率较低;
⑥脐带血受胎盘屏障的保护,细胞自身传染病感染率较低;
⑦相较于胚胎干细胞移植来说,脐带血干细胞移植不存在伦理问题。
间充质干细胞是目前临床上应用广泛的干细胞胚胎干细胞(Embrtibuc stem cell)的发育等级较高,是全能干细胞(Pluripotent stem cell),而成体干细胞的发育等级较低,是单能干细胞。干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。它包括胚胎干细胞和成体干细胞。干细胞的发育受多种内在机制和微环境因素的影响。目前人类胚胎干细胞已可成功地在体外培养。研究发现,成体干细胞可以横向分化为其他类型的细胞和组织,为干细胞的广泛应用提供了基础。 在胚胎的发育中,单个受精卵可以分裂发育为多细胞的组织或器官。在成年动物中,正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生。胚胎的分化形成和成年组织的再生是干细胞进一步分化的结果。胚胎干细胞是全能的,具有分化为几乎组织和器官的能力。而成年组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织。 然而,这个观点目前受到了挑战。 的研究表明,组织特异性干细胞同样具有分化成其他细胞或组织的潜能,这为干细胞的应用开创了更广泛的空间。 干细胞具有自我更新能力(Self-renewing),能够产生高度分化的功能细胞。干细胞按照生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞 。
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脐带血造血干细胞脐带血(Cord blood)是胎儿娩出后,常规脐带结扎并离断后残留在脐带和胎盘中的血液,一般小于100ml,通常废弃。脐带血中有可以重建人体造血和免疫系统的造血干细胞,用于辅助治疗白血病、再生障碍性贫血等血液系统疾病。脐带血作为人类生物资源储存已得广泛,但是它的应用受限于有限的血液量,使用时需要配型。那么我们到底该存哪种呢?其实存哪种视个人情况而定。在围产期可以选择给宝宝存储脐带/胎盘间充质干细胞、造血干细胞;若错过了围产期,可在儿童时期为孩子存储牙髓干细胞;可为自己存储脂肪间充质干细胞。
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临床冻存 P B S C 常采 用 0.5xl08—— 1.0xl08个/ m l 的细胞浓度。McElwain、 Mangalik、 Bumett等分别将骨髓造血干细胞在 4°C保 存 8 h 、 72 h 和 48 h后进行回输,并取得了成功。非 低 温 4 ¾ 保 存 P B S C , 简化了移植过程,无需加入冷冻保护 液 ,避免冻存过程对细胞的损害,仅需要骨髓保养液,可减少回输时的毒副作用;减少 P B S C 在体外污染的机会;有利于造血重建。因此它是一种简便可行,,经济有效的体外保存方法。缺点是保存时间较短,不 宜 超 过 72 h ,当预处理方案为3〜 4 天
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