中山医院附属第三医院干细胞
脐带血有哪些用途?
脐带血中的造血干细胞可以用来治疗多种血液系统疾病和免疫系统疾病,包括血液系统恶性肿瘤(如急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤等)、骨髓增殖异常综合征、血红蛋白病(如海洋性贫血)、骨髓造血功能衰竭(如再生障碍性贫血)、先天性代谢性疾病、先天性免疫缺陷疾患、自身免疫性疾患、某些实体肿瘤(如小细胞肺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌等)。
将 采 集 的 P B S C 用 R P M I 1 6 4 0 营养液调细胞浓度在 2 x l 0 7—— l x l 0 8 范围内,与等量预冷的冷冻保护液混匀,分别注入低温冷冻袋内,并留取检测样品注入冷冻管。将冷冻袋(管)放入已预冷至4℃程控降温仪内,程序化降温。 -l℃/min,降至-4〇 ℃,平 衡 3 min, -5℃ /min,降至-80℃ ,取出后放人液氮内(- 1 9 6℃)保存。存放时间为 5 年 。
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首先,细胞储存需要严格的技术流程和制备技术,因此符合规范的流程体系是一项重要的考核,如果没达标,很可能造成样本损毁或是交叉。其次,存储机构所掌握的核心技术也重要,根据储存数量和种类的要求,其技术水平也会成倍提升。如果技术不过关,很可能出现复苏后细胞数量、质量不达标,无法使用的情况,耽误后续治疗。重要的一点是,该机构是否拥有干细胞应用转化的能力,其制备的干细胞制剂能否为相关医院应用。
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非程控降温深低温保存法下面介绍几种不同保护液组方的保存方法:保 护 液 配 方 :2 0 % D M S O ,1 2 % 右旋糖軒 (dextmn,Sigma 公司),生理氯化钠溶液。在冰水浴中,将浓缩的有核细胞加入等体积的低温保护液 (D M S O 终 浓 度 为 10%),混 匀 ,置-80℃冰箱存放 4 h ,再置液氮中保存,有核细胞终浓度为 (2.34±2.06)xl09 个/L (马庆 2003)。
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