惠正干细胞
脐血干细胞的保存 婴儿出生后,留在脐带及胎盘内的血就是脐带血。自古以来,这些血被当成废物丢弃,目前采集脐带血的方式是:婴儿出生后,脐带接扎,剪断,婴儿由助产护士、擦洗、包裹、护理的同时,既可从脐带血(体内采集),也可待胎盘娩出后再采集(体外采集)。两种方法采集量均可在80ml 左右。
脐血采集不会对婴儿和母体造成任何不利影响,只是将原来作为废弃物的脐血收集下来。但应注意的一点是,采集后的脐血应于 24 小时之内进行处理,运送过程中应避免紫外线照射及剧烈震荡,以充分保持细胞的活性。保存者应在产前提前与医院及脐血库联络,以保证脐血的及时、顺利采集。
冷冻保护液的添加用 1640培养液将无菌的保护液 (DMS〇 )配 成 20 % 浓 度 ,取与胎肝悬液等体积的2 0 % D M S O , 缓慢加人细胞悬液中,室温静置 10min ,再将样品放入降温仪中。程序降温法:多采用两步或三步降温法,即 开 始 时 从 室 温 以 降 温 ,降至- 3 0 ℃时 ,恒 温 2m i n 后 改 为 5——7℃ /m i n 降至-80℃或- 9 0℃ , 再转入液氮中 ( - 1 9 6 ℃ ) 长期保存。也有人主张开始降温速度应严格控制在1-3℃ /min,但经过相变(-11—15℃)热释放之后即可加速降温速度,余下各阶段对细胞存活影响不大。
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由于保存方法的不同,复温的形式有多种。从液氮中取出样品,在 37——42℃水浴下复温,时间不超过 5 min。过滤脐带血,将其置入过的输液瓶里,封 口 ,待患者使用。取出样品复温,水浴温度控制在4 1 ℃ ,每份脐血均可在2m i n 内冻融。加入等体积的 5 % 白蛋白和 10% L M D 混合液,混匀平衡 5 min 后离心去 D M S O , 再 用 L M D 调细胞悬液。
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Q:干细胞采集好了,怎么保存?能保存多久呢?干细胞样本送到实验室后→由的工作人员接收,核对供者资料,建立电子档案,检查相关资料(包括每份样本所属资料如:血袋、各检测应用试管、培养器皿等一切用品,条形码统一标识→制备(留取检测标本)→冻存(-196℃液氮)。每一环节都有2人以上核对,以每一份干细胞的各相关资料及检测标本的统一。每个液氮罐都有计算机自动控制补充液氮系统和电子自动报警装置,同时工作人员每日检查和记录罐中的液氮量,确保干细胞的保存。保存的干细胞在使用前,工作人员还会进行复核,以确保干细胞各项符合出库要求。
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