内蒙鄂尔多斯腾龙生物科技有限公司
干细胞被医学界称为“万能细胞”，通俗的讲，干细胞就像是生命的种子，是一种可以自我更新和再生的多功能细胞。在一定的诱导条件下，可以分化成多种功能细胞，具有修复各种组织功能和再生器官的能力。
干细胞是人类重要的生物资源，近年来，干细胞作为新兴的医疗技术发展迅速，对多种疾病的干预治疗效果显著。
目前国内的干细胞治疗需在具有细胞临床应用资质的细胞工程单位，一些三甲医院也有干细胞治疗临床应用转化项目。
20世纪末以来，以干细胞技术为依托的干细胞治疗，成为小分子化学药、大分子蛋白药后的，第三次药物革。
近些年，在国内有关细胞治疗的报道已经屡见不鲜，以国家层面为主导，各地方大力推动，干细胞产业医学研究和应用迈入了快速发展的阶段。
目前正在开展的干细胞治疗临床试验涉及上百种疾病，包括脊髓损伤、脑中风、渐冻症、老年痴呆症、骨关节炎、帕金森、肝硬化、系统性红斑狼疮以及卵巢早衰等等。
P B S C 与回输:冻存物自液氮中取出后立即放入42℃水浴箱中，融化后立即回输给患者。细胞活力测定:将待测样本分别于冷冻保存前与复苏后Oh、 3 h 、 6 h 采用台盼蓝拒染法检测细胞存活率(吕 秀 荣 2 0 0 4)。这是没有速控条件下的冷冻方法，简单，易重复操作。但是由于这种降温方式在降温的过程中降温速度不恒定，冷冻保护液选择和其对细胞回收率的影响备受重视。Stiff报道了以6 % 羟乙基淀粉 (H E S )、5 % D M S O 及 4 % 人血清白蛋白(A L B )混合物作为冷冻保护液，用非程控降温将骨髓细胞置于- 8 0 ℃冻存的方法。 Halle等(2004)采 用 1 %H A S + 3 . 5 % H E S + 2 . 5 % D M S O 。张俊萍等将D M S O 、 H E S 、 A L B 和 H A S 按不同比例组成冷冻保护液，发 现 5 % D M S O + 6 % H E S +H A S 效果好。范华骅等研制的C P 8 0 低温保护 液 含 7.5% 右旋糖酐、 6.25% D M S O 和 6.25% A L B ，与样品混合后D M S O 浓 度 为 5 % 。
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胎肝细胞悬液的制备人胎肝取至水囊引产或剖腹产的4〜6个月正常胎儿。在无菌条件下从腹腔取出胎肝，同时从心脏取血查胎儿血型。剔除粘连在肝脏表面的结缔组织和胆囊后，将肝脏置于培养皿中剪成小组织块，然后投入装有双层不锈钢(内层孔径为 1 0 0 目，外 层 为 1 8 0 目/in2(lin2=6.451600xl0-4 m 2))的小烧杯。用少量培养液或生理盐水(经细胞培养，热原试验均为阴性)，将组织块冲洗2〜 3 次 ，弃去洗涤液，然后倒入20 ml P R M I 1640培养液，并用注射器针芯在钢网内将组织块研磨，如此 重 复 3 次 ，即可取出胎肝中大部分的造血干细胞。将合并收集的细胞悬液通过4 号的注射器制成单细胞悬液。
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米 用 6 % (质量分数) 轻乙基淀粉(h e s ， 平均相对分子质量 480 000， H e s p a n ， D u p o n ,美国) 沉降后一次离心方法去除大多数红细胞及大部分血浆。具体方法:每份脐带血按体 积 比 1 : 4 的比例加入脐带血内，充 分 混 勻 ，垂 直 倒 置 悬 挂 ，使红细胞自然沉降20〜 3 0 m i n ， 直至红细胞界面下降时，去除红细胞。再将富含有核细胞的血裝在 1〇℃ 4 00g 离 心 l O m i n ， 沉降有核细胞。用血浆积压器去除部分血浆。体 积 为 30——40ml。以上操作均在采集袋中操作 。
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